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MFC琼脂培养基原理及使用方法

李令梅
录入时间:2021-4-25 11:03:41 来源:青岛海博生物

一、培养基用途


  用于生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群测定。


二、试验原理


  胰蛋白胨、多价蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖为可发酵糖类;3号胆盐抑制革兰氏阳性菌;琼脂是培养基的凝固剂;苯胺蓝和玫红酸为pH指示剂。


  粪大肠菌群可在44.5℃条件下分解乳糖产酸,使培养基pH下降,菌落为亮蓝色,其他不发酵乳糖的肠道菌菌落为无色、灰色或淡红色。


三、培养基配方(g/L)


多价蛋白胨

5.0

胰蛋白胨

10.0

乳糖

12.5

酵母粉

3.0

三号胆盐

1.5

氯化钠

5.0

苯胺蓝

0.2

琼脂

15.0

玫红酸

0.1

pH值7.4±0.2 25℃


四、试验方法


  1.称取本品52.3g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,冷却至45-50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌。


  2.制备好的平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。


  3.使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。


  4.制备质控菌液。选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。


  5.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次,去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。


  6.44.5℃倒置培养基培养24±2小时,记录实验结果。


五、结果观察与解释


  接种以下质控菌株,44.5℃倒置培养基培养24±2小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

蓝色菌落

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

20-200

PR≥0.7

无色菌落

福氏志贺氏菌

ATCC12022

20-200

PR≥0.7

无色菌落

产气肠杆菌

ATCC13048

20-200

PR≥0.7

灰色菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

/

/

半定量

G≤1

/


  MFC琼脂微生物质控结果:






大肠埃希氏菌

蓝色菌落




鼠伤寒沙门氏菌

无色菌落











福氏志贺氏菌

无色菌落




产气肠杆菌

灰色菌落











金黄色葡萄球菌

抑制






六、注意事项


  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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