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品红亚硫酸钠琼脂培养基的试验原理、方法及现象

刘凯凤
录入时间:2021-4-27 10:48:21 来源:青岛海博生物

一、用途


  本产品用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证(GB标准)。


二、试验原理


  蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生长所需碳氮源、维生素和矿物质;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色;乳糖为可发酵的糖类,乳糖发酵的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落,快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明菌落。


三、培养基配方(g/L)


蛋白胨 10.0
牛肉粉 5.0
酵母粉 5.0
磷酸氢二钾 3.5
乳糖 10.0
琼脂 13.0
碱性品红 1.0
亚硫酸钠 5.0
pH7.2-7.4 25℃


四、试验方法


  1.称取本品52.5g,加入20mL无水乙醇和980mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热搅拌溶解,按需分装,116℃高压灭菌20min,备用;


  2.质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成;


  3.取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中;


  4.将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱,于36±1℃需氧培养24±2h,观察实验结果。


五、试验结果判断


  1.外观


  此干燥培养基呈紫色粉末状态,高压灭菌后制备好的固体培养基为浅红色。


  2.生物学实验


  接种以下质控菌株,放入培养箱中,于36±1℃培养24±2h,观察试验结果。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

方法

质控情况

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

20-200

定量

PR≥0.7,紫红色菌落,有金属光泽

大肠埃希氏菌

ATCC 8739

20-200

定量

PR≥0.7,紫红色菌落,有金属光泽

弗氏柠檬酸杆菌

ATCC 43864

20-200

定量

PR≥0.7,紫红色菌落,稍有金属光泽

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

/

定性

橙红色菌落

粪肠球菌

ATCC 29212

/

半定量

G≤1


  品红亚硫酸钠琼脂培养基微生物质控结果:






大肠埃希氏菌ATCC 25922

紫红色菌落,有金属光泽




大肠埃希氏菌ATCC 8739

紫红色菌落,有金属光泽











弗氏柠檬酸杆菌ATCC 43864

紫红色菌落,稍有金属光泽




鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028

橙红色菌落







粪肠球菌ATCC 29212

抑制

 

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