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酒石酸盐生化管的使用原理及注意事项

杨永帅
录入时间:2021-4-29 13:16:51 来源:青岛海博生物

一、实验原理


  酒石酸盐试验是肠杆科菌鉴定常用的生化实验,有一些细菌可以产生特定的酶将酒石酸盐分解为乙酸等比较简单的有机酸,使pH值下降,遇到酚红指示剂后变黄色,而不产该酶的细菌仍为红色。需要注意的是,该实验需在接菌后覆盖一层无菌的液体石蜡以隔绝氧气,避免乙酸等氧化分解,导致pH值重新升高又变为红色,从而造成假阴性。


二、试验方法


  选取甲型副伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌,分别穿刺接种至酒石酸盐生化管中,为了验证氧气对该实验的影响,每种菌做两管,其中一管覆盖无菌液体石蜡,另一管不覆盖。37度培养18小时、24小时各观察一次结果。


三、实验结果


  1、不加石蜡生化管,培养18小时。



  

  由上图可发现,鼠伤寒沙门氏菌底部有变黄,为阳性反应,甲型副伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌为红色,为阴性反应。


  2、不加石蜡生化管,培养24小时。



  

  由上图可发现,鼠沙由黄色变为红色,说明此时产生的乙酸被氧化分解,导致pH值又重新升高变为红色。


  3、培养24小时,加石蜡组与不加石蜡组对照。


鼠伤寒沙门氏菌


甲型副伤寒沙门氏菌


乙型副伤寒沙门氏菌


  由上图可以发现加石蜡组,黄色会稳定存在,不会被氧化为开始的红色,且黄色更为明显,更有助阳性结果的判定。


四、结论


  在做酒石酸盐生化实验时,接菌后应该覆盖一层无菌液体石蜡,防止实验结果被氧化,造成假阴性。

 

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